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脫氫酶是一類能催化物質(zhì)（如糖類、有機(jī)酸、氨基酸）進(jìn)行氧化還原反應(yīng)的酶，在酶學(xué)分類中屬于氧化還原酶類。這些酶在反應(yīng)中被氧化的底物稱為氫供體或電子供體，而被還原的底物稱為氫受體或電子受體。當(dāng)受體是氧氣時，催化該反應(yīng)的酶稱為氧化酶，其他情況下都稱為脫氫酶。不同的脫氫酶幾乎都根據(jù)其底物的名稱命名。生物體中絕大多數(shù)氧化還原反應(yīng)都是在脫氫酶及氧化酶的催化下進(jìn)行。物質(zhì)經(jīng)脫氫酶催化氧化，最后通過電子傳遞鏈而被氧氧化，此時通過氧化磷酸化作用生成腺苷三磷酸（ATP），是異養(yǎng)生物體取得能量的主要途徑。下面就將對脫氫酶的檢測進(jìn)行詳細(xì)介紹。

脫氫酶檢測項目

關(guān)于脫氫酶，可對其提供活性測定、km值測定、含量測定、吸光度測定、漏出率測定、比活力測定、細(xì)胞毒性測定、波長測定等檢測項目。

同時可對乳酸脫氫酶、乙醛脫氫酶、谷氨酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、磷酸脫氫酶等進(jìn)行檢測。

脫氫酶檢測方法

脫氫酶的測定方法主要包括活性污泥脫氫酶活性的測定和乳酸脫氫酶（LDH）的測定。活性污泥脫氫酶活性的測定旨在評價工業(yè)廢水的生物可降解性，通過測定活性污泥在不同工業(yè)廢水中脫氫酶活性的變化情況來評價工業(yè)廢水成分的毒性。這種方法基于脫氫酶是一類氧化還原酶，能夠催化氫從被氧化的物體轉(zhuǎn)移到另一個物體上，通過指示劑的還原變色速度來確定脫氫過程的強(qiáng)度。常用的指示劑有2,3,5三苯基四氮唑氯化物(TTC)或亞甲藍(lán)，它們在接受脫氫酶活化的氫而被還原時具有穩(wěn)定的顏色，通過比色的方法測量反應(yīng)后顏色深度來推測脫氫酶的活性。12

乳酸脫氫酶（LDH）的測定方法則更加具體，包括實驗前的試劑配置、加樣、溫育、洗板、顯色和測量光密度值等步驟。這種方法通常使用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)，通過生物素標(biāo)記抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液的添加，以及底物溶液的顯色反應(yīng)，最后測量各孔的光密度（OD）值來定量分析LDH的活性。

此外，乳酸脫氫酶同工酶的測定方法包括電泳法、離子交換柱層析法、免疫法、抑制法和酶切法等多種方法，這些方法能夠分離和測定LDH的不同亞型，從而提供更詳細(xì)的信息關(guān)于LDH在特定生理或病理條件下的作用。

脫氫酶檢測標(biāo)準(zhǔn)(部分)

1、DB34/T 1729-2012 窖泥中脫氫酶活性的分析方法

2、WS/T 361-2011 乳酸脫氫酶催化活性濃度測定參考方法 

3、BS EN ISO 23753-2:2011 土壤質(zhì)量.土壤中的脫氫酶活性測定.氯化四氮唑法(INT)

4、KS I ISO 23753-2-2006(2016 土壤質(zhì)量土壤脫氫酶活性的測定第2部分:氯化碘三唑法

5、ISO 18187:2024 土壤質(zhì)量 利用土壤脫氫酶活性對固體樣品進(jìn)行接觸試驗

6、UNE 81592:1991 生物控制 血液中 Δ-氨基酮酸脫氫酶（ALA-D）活性的測定 光譜法

7、KS I ISO 23753-2:2006 土壤質(zhì)量.土壤中脫氫酶活性的測定.第2部分:氯化四氮唑法(INT)

8、BS EN ISO 23753-2:2019+A1:2020 土壤質(zhì)量 土壤中脫氫酶活性的測定 使用氯化碘四唑 (INT) 的方法

9、BS EN ISO 18187:2018 土壤質(zhì)量 利用球形節(jié)桿菌脫氫酶活性進(jìn)行固體樣品接觸測試

10、KS I ISO 23753-1-2006(2016 土壤質(zhì)量土壤脫氫酶活性的測定第1部分:氯化三苯基四氮唑（TTC）法

11、ISO 23753-2:2019 土壤質(zhì)量.土壤中脫氫酶活性的測定.第2部分:碘特拉唑氯化物（INT）法

12、BS EN ISO 18187:2024 土壤質(zhì)量 利用球形節(jié)桿菌脫氫酶活性進(jìn)行固體樣品接觸試驗

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